International Academy of Cosmetic Dermatology




inte rnational Academy of Cosmetic Dermatology

gram stain



Gram stain (som i stedet bør være kjent som Gram-farging) ble utviklet av Christian Gram i 1884. Denne teknikken kan skille mellom to morfologisk forskjellige klasser av bakterier, kalt Gram-positive, oppkalt etter sin affinitet for fargelegging gram, og gram-negative, tar de ikke den gram flekken, men er imot å gi safranin røde organer.

ytelse

  • Et tynt lag av prøven er spredt på et mikroskop-objektglass, tørket og varme festet til glasset. Unnlatelse av å bruke en skikkelig utvannet prøven kan føre til et eksemplar som er for tykk og er tolke
  • Sleiden er oversvømmet med en krystallfiolett oppløsning og tillatt å farge i 30 sekunder til to minutter. Jo lengre tid er vanligvis brukt flere eksemplarer når 'gruppebehandling ".
  • Den lilla krystall er forsiktig skylt med vann og sleiden inkubert jod Gram per> 30 sekunder. Jod vil sette krystallfiolett for peptidoglykan av gram-positive celleveggen.
  • Etter skylling av Gram jod med vann, blir sleiden raskt avfarget med aceton. Forfatteren vanligvis decolorizes, før det er ikke lenger den krystallfiolett utstrømningen.
  • Raset er deretter kontra med safranin i noen sekunder, skylt og tørket luft. Raset er deretter undersøkt med en olje nedsenking linse på ~ 100X.

tolkning

  • I de mest hensiktsmessige prøver, spesielt med purulence, ark av polymorfonukleære leukocytter vil bli sett. Ispedd med hverandre (eller omsluttet av celler) kan ses bakterier. (blå) Gram-positive sfærer (kokker) i kjedene er konsistent med streptokokker, mens Gram-positive kokker i klynger er i samsvar med stafylokokker. Selv i mer purulent prøver, kan antallet organismer fremgår overraskende liten. Gram-negative kan variere i lengde, men er vanligvis i form av en stang. De kan være vanskelig å se hvordan det normale proteinet bakgrunn samler safranin og er farget rød.
  • Og "mer nyttig hvis det er en enkelt organ sett med konsekvent morfologi. Observasjon av flere gram-positive organismer og / eller gram-negative taler kolonisering eller forurensning av prøven.
  • Av og til kan gjenstander bli sett. Krystallfiolett kan utfelles fra oppløsningen, noe som gir inntrykk av "soppelementer. forurenset fargende oppløsning kan gi inntrykk av at bakteriene er tilstede, men en ledetråd er at alle prøvene farget med denne løsningen vil utføre bakteriene med de samme egenskapene av flekken.

Jack M. Bernstein, MD
Dayton, OH, USA

For utskrift, kan du laste ned denne PDF-filen.

RETURN kosmetisk dermatologi 101 MENY



Legg igjen en kommentar