Novaultra safranin, eller flekker kit




"Forrige Neste"
  • print
Sider: [ 1 ] gå av

forfatter Emne: Kit NovaUltra Safranine O Stain (4748 ganger)

0 medlemmer og 1 gjest leser dette emnet.

NKouris
  • Nybegynner
  • Innlegg: 3
NovaUltra safranin O Stain Kit " ovenfor: 5 november 2012, 02:53:42 » Jeg kjøpte safranin O Stain Kit (http://www.ihcworld.com/catalog/p4159/NovaUltra-Safranin-O-Stain-Kit/product_info.html), og kontroll kurs og chondrogenic prøver. Jeg hadde mine prøver fiksert i 4% PFA, dehydrert og i parafin, etterfulgt av dissekere og deretter flekker protokoll i henhold til protokollen som følger med kit (Weigert jern hematoksylin i 10 minutter, Fast Grønn i 5 minutter, eddiksyre for 10 sek, og safranin O for 5 min). Alle prøver "positivt" farget, som har en rød farge uten grønne / blågrønn bakgrunn farging.

prøvene jeg hadde samme mye tidligere farget med en tredje part profesjonell og kontrollene var lyse blå / grønn vann og chondrogenic prøvene var rød (som forventet).

Jeg prøver å løse årsaken til at alle prøvene er røde, da jeg kom over prøvene med dette settet og protokoll. Har inkubasjonstid på 5 min safranin O må reduseres for å unngå dette overstaining falske positiver?



logget NovaUltra safranin O Stain Kit " ovenfor: 5 november 2012, 02:53:42 » Gula
  • Global Moderator
  • Goldmember
  • Innlegg: 356
Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 1 svaret: 6 november 2012, 13:48:05 » Det var en andre skylling skritt etter Safanin O? Du kan prøve å vaske i 1% eddiksyre etter, utvide den til safranin O er sweapt ut av uønskede områder. Når eddiksyren ikke fører til suksess, forlenge skylling i 96% etanol. En av disse burde føre til en differensiering av farging.
Gula logget NKouris
  • Nybegynner
  • Innlegg: 3
Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 2 svaret: 7 november 2012, 08:39:14 » Takk for råd Gula. Jeg har vært i kontakt med Richard og informert meg om at jeg var med den gamle protokollen, i denne rekkefølgen:
jern hematoksylin
berøre H20
rask Verde
eddiksyre
dH2O
safranin O

Nå jeg brukte protokollen oppdatert på nettstedet ditt med denne rekkefølgen:
jern hematoksylin
preg H2O
safranin O
dH2O
rask Verde
eddiksyre

Dette har bidratt til å redusere den overveldende rød flekk i alle prøvene, men det er lite eller ingen blå / grønn bakgrunn flekk. Dette gjelder selv med en reduksjon av safranin O i 2 minutter, og en økning i dehydrering av 95% EtOH i 5 min. For å få bakgrunnen vibrerende flekken skal mer tid brukt bla Verde> 10min?

jeg sendt til Richard bilder for å illustrere problemet. Ytterligere hjelp er verdsatt. logget Gula
  • Global Moderator
  • Goldmember
  • Innlegg: 356
Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 3 Svaret: 7 november 2012, 13:51:02 » Hei,
er bare en IHC bruker rundt om i verden, og har ikke noe ansvar :).
orden nå, i dette conversing. Skyll etter grønn hurtig bør minimaliseres i eddiksyre og fortynnet etanoler. Kanskje langvarig skylling etter safranin O og rask grønn først, gjør lyspunktet.
lykke
Gula logget NKouris
  • Nybegynner
  • Innlegg: 3
Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 4 svaret: 8 november 2012, 13:17:29 » Sitat fra: Gula 7 november 2012, 01:51:02 Hei,
er bare en IHC bruker rundt om i verden, og har ikke noe ansvar :).
orden nå, i dette conversing. Skyll etter grønn hurtig bør minimaliseres i eddiksyre og fortynnet etanoler. Kanskje langvarig skylling etter safranin O og rask grønn først, gjør lyspunktet.
lykke
Gula

Oh, ser jeg. Så jeg virkelig setter pris på din tilbakemelding! Jeg har økt jern haematoxylin og raske grønne skritt med 2 ganger 20 minutter, og redusert eddiksyre fra en halv trinn til 5 sek, og nå har jeg diskret blått bakgrunnsfarging. Ikke så levende som jeg har sett fra andre, men det er. Dette har redusert safranin O flekker også, så jeg kan prøve å øke raskere enn 30 minutter Grønne å bli mer levende og øke safranin 2 til 3 minutter å komme seg litt "av den røde flekken. Takk for all hjelp, sporet her! logget Gula
  • Global Moderator
  • Goldmember
  • Innlegg: 356
Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 5 svaret: 9 november 2012, 01:38:02 » Andre Trichrome flekker fungere bedre etter re-fiksering med Bouin, fordi formaldehyd er vanligvis blokkerer en del av farge funksjonelle grupper som er nødvendige.
Dette er for å inkubere den Bouin glir i 60 min i 60 ° C, deretter vaskes med vann inntil den var klar. Deretter komme videre med farging.
som kan være nyttig.
Gula logget Re: NovaUltra Safranine O Stain Kit " # 5 svaret: 9 november 2012, 01:38:02 »
  • print
Sider: [ 1 ] gå på "Forrige Neste"
  • »
  • Produkter og utstyr diskusjon »
  • Histologi produkter (Moderatorer: Excalibur, ImmunoNYC) »
  • NovaUltra safranin O Stain Kit



Legg igjen en kommentar