Spesial flekken i histopatolog




Spesial flekken i histopatolog
  • 1. Spesial flekken i histopatologPresentert av Dr. Mahesh Guide: Dr. S. P. Hiryur - Førsteamanuensis
  • 2. • spesielle farger brukes til å identifisere visse normal og unormal stoff som finnes i celler og vev, som ikke kan identifiseres på inngrepet Haematoxylene når en stor farve Molekylstørrelsen er i stand til å trenge inn, vil det blalltid gjør det på de minste utgifter molekyl.
  • 43. Masson trichome flekken • Denne metoden blir anvendt for påvisning av kollagen Fibrene i vev som hud, mage, tarm og lunge. • De kollagenfibre er farget blått og deres kjerner vil være farget svart.
  • 44. Masson Trichrome flekken prinsipp: Som for navnet er brukt 3 fargestoffer som muskel selektivt beis, kollagenfibre, fibrin og erytrocytter. Som en generell regel i Trichrome flekke mindre porøse vev er farget av små dye molekyl. Acid fuksin flekk rundt bindevev, PMA (fosfomolybden Syren) konkurrerer med fuksin og adgang Kollagen flytte fuksin. Hvis reaksjons stoppet på riktig tidspunkt, vil kollagen Gratis å være farget av metyl blå.
  • 45. • Reaent brukt - jern hematoksylin løsnings Weigerts - Phosphomolybdic- fosforwolfram oppløsning av syren - Biebrich scarlet fucshin syreløsning - Aniline Blå Solution - Eddiksyre løsning 1% • Resultat - Nuclei: Sort Kollagen: Blå Cytoplasma, Muskel, RBC: Red • Positiv kontroll: Hud, lunger, mage, tarm
  • 46. Pocedure: Masson Trichrome flekken • Dewax delen og bringe vannet • Vask i vann fra springen • Stain med hematoxylene weigerts jern i 10 minutter • Vask godt i rennende vann i 10 minutter • Vask i destillert vann • Stain i Biebrich Scarlet syrefuksin i 10-15 minutter • Vask i destillert vann. • Skille i fosfomolybden-fosfowolframsyre løsning i 10-15 minutter • Transfer § direkte (uten skylling) anilin blå løsning og flekken i 5-10 minutter
  • 47. • raskt skylt i destillert vann og skille in1% eddiksyreoppløsning i 2-5 minutter • Vask i destillert vann • Dehydrate gjennom alkohol, xylen og mount DPX.
  • 48. resultat Collagen- Blå Cytoplasma, RBCs- Red • membranoproliferative glomerulonefritt på Masson trichome flekken
  • 49. Bruk av Masson Trichrome flekken • Den brukes til å skille mellom kollagen og glatt muskel i kreft. • Å identifisere økt kollagen avsetning forhold slik som skrumplever, keloider, benign prostatahyperplasi, glomerulonefritt membranoproliferative etc.
  • 50. Van Gieson FLEKK prinsippet Når du bruker en kombinert løsning av pikrinsyre og syrefuksin, små pikrinsyre molekyler trenge all vevet raskt, men det er bare fastholdt i tett tekstur røde blodceller og muskel. De større molekyler av Ponceau S fortrenger molekyl av pikrinsyre fra kollagen fibre, som har større porer og tillate større molekyler til enter. Den brukes for påvisning av kollagen. Resultat - rød til rosa eosinofil granulater, Nuclei - Blå
  • 66. PROSEDYRE: (Kongo rød flekk) 1. Deparaffinize og hydrat i vann. 2. Stain i Kongo rød løsnings for5 minutter. 3. Skille med alkoholisk kaliumhydroksid Løsning for 3-10 sekunder. 4. Vask i vann, beis kjerner alum hematoxyllin, differensiere og blå. 7. dehydrate, xylen og montere.
  • 67. Det er anvendt for å demonstrere amyloidavleiringer • Nedsatt amyloidosis- hos dialysepasienter lenge • Medulary thyroideakarsinom, • karveggen i tilfelle av Alzheimers sykdom • hjertearytmier, etc.
  • 68. Positive rød farge er til stede rundt den store sentralarterien og et mindre fartøy til sin rett. Høyre panel viser grønt dobbeltbrytning som er diagnostiske av amyloid, når den røde Kongo bush er sett med polarisert lys. Alt amyloid har et fibrillært ultrastruktur som gir denne reaksjon.
  • 69. Crystal / metyl fiolett for amyloid • krystallfiolett eller metyl fiolett flekk blir brukt til å metachromatic farging amyloid. • de beis amyloid som en lilla-rød i blå bakgrunn. Reagensene som brukes • / metyl fiolett krystall • Alkohol 95% • 1% vandig ammonium oksalat • eddiksyre 0,2%
  • 70. Utarbeidelse av løsninger • Løs opp 2 g krystallfiolett / metyl i 20 ml 95% alkohol og 80 ml av 1% vandig ammonium- oksalat knuse bruker minimalt med varme. Heftig og filter
  • 71. prosedyre • Sett vannstanden delen. • Stain i lilla løsning / methyl krystall i 5 minutter. • Vask og differensiere til eddiksyre 0,2% kontroll differensiering mikroskopisk arrestere differensiering i vann og repeter til en god kontrast oppnås mellom amyloid og bakgrunn. • Vask og montert i DPX. RESULTAT Amyloid - Viola Backgrond - Blå
  • 72. Amylod - lilla Bakgrunn - blå
  • 73. andre del
  • 74. Flekker av lipider - Olje Red O - Sudan Svart B
  • 75. Olje eller rød flekk PRINSIPP: Fargingen med oljeoppløselige fargestoffer refererer til øket oppløselighet av fargestoffet i lipid stoffer i de vanlige vann-alkohol fargestoff løsemidler. resultat Lipid - Rød nucleic Blå
  • 76. • Reagenser: • 60% isopropanol • Alum hematoxylin: • Gelatin Glyserin festemidler arbeidsløsning • Olje Red O: eller å gjøre stamløsning av olje rød O • Oil red O - 0,5 g • Isopropanol 100 ml Oppløs farvestoff i isopropanol, ved hjelp av den mest milde varmen i vannbad. Dette er lagerløsningen. eller å lage en fungerende løsning av olje rød O • Fortynn 30ml på lager flekken med 20 ml destillert vann og la stå i 10 minutter, sil i Coplin krukke og dekker immedeiately. • Arbeids løsning bør gjøres frisk hver gang.
  • 77. PROSEDYRE: (O rød flekk Oil) • Korreksjons lysbilder i 10% formalin hvis frisk. • Vask i rennende vann i 1-10 minutter å renne ut det overskytende vann. • Skyll med 60% isopropanol. • Lakkering med arbeidsløsning olje nylaget O rød i 15 minutter. • Skyll med 60% isopropanol. • kjerner lett skrubbe med alun Hematoxylin 5 dykk. • Skyll med destillert vann. • Monter med vandig monteringsmedium, glyserin gelé.
  • 78. emboli visum fett som rød prikk inne i kapillærene i lungene i rød olje O flekken
  • 79. Leversteatose -stain Oil red O
  • 80. bruksområder • O rød skogbrann brukes til nøytral farge triglyserider, lipider og lipoproteiner. • Svulstene avledet fra fettcellene (liposarcomas) kan være differensiert fra andre typer av tumorer. • fett som forekommer i en unormal sted, for eksempel fett emboli som kan utvikle seg etter en beinbrudd eller eller en skade som knuser en feit kropp. • fra lipid lagring sykdom som Nieman-Picks sykdom • For å demonstrere fett eller lipider i fett som conidition leveren. • I hematologiske tilstander som Burkitt lymfom og histiocytisk syndrom blått hav
  • 81. FAT - SUDAN BLACK B - propylenglykol PRINSIPP: Sudan Svart B er et farvestoff som er uoppløselig i vann, men Det løser opp i fett. Derfor er dette fargestoff vil akkumuleres i fettet blodceller inne i cellene. • Det er litt grunnleggende fargestoff og kombinere med syre grupper i forbindelser lipider, fosfolipider farging så også. resultat FAT Blue / Black nucleic Red
  • 82. reagenser: • 85% propylenglykol: Propylenglykol -85,0 ml -15,0 Ml destillert vann • hematoxylin: • Sudan Svart / propylen: Sudan Svart -0,7 g Propylenglykol -100,0 ml
  • 83. PROSEDYRE: (svart flekk Sudan) 1. Korreksjons lysbilder i 10% formalin hvis frisk. 2. Vask i vann fra springen, vask med destillert vann, avløp det overskytende vann. 3. Propylenglykol, to endringer, 5 minutter hver. 4. Stain i Sudan Svart, 7 minutter, rør. 5. Dypp i 85% propylenglykol, 3 minutter. 6 Skyll med destillert vann. 7. Stain med atom rød, 3 minutter. 8. Vask i vann. 9. Vask i vann fra springen, vasking i destillert vann. 10. Monter med vandig montering, glyserin gelé.
  • 84. bruksområder • Sudan sort anvendes for den nøytrale farge triglyserider, lipider, lipoproteiner og fosfolipider. • I hematologisk lidelse kan det brukes til å differensiere eksplosjon som skrubbe myeloblast, men lymfatisk ikke flekker.
  • 85. Myeloblast på Sudan svart flekk
  • 86. MASSON FONTANA metode-FOR melanin Melanin er en ikke-lipid, ikke-hematogenous pigment. Det eksisterer en pigment brun-svart normalt i hår, hud, netthinnen, iris og visse deler av CNS. PRINSIPP:  Den melanin er uløselig i organiske løsemidler, men løselig i 1M hydrooxide natrium.  Det er langsomt bleket med sterke oksidasjonsmidler.  De ammoniakalsk sølvnitratløsninger er redusert Melanin svart metallic sølv er grunnlaget for Masson Fountain metode for demostrating melanin.
  • 87. BRUK: • Identifisere melanin og argentaffin granuler. • Diagnosen malignt melanom • Argentaffin granuler som finnes karsinoide svulster.
  • 88. Melanin pigment i huden som viser RESULTATER: Melanin, argentaffin granulater - Svart -Red kjerner
  • 89. Melanin pigment i ondartede celler melanom, Fontana-Masson flekken.
  • 90. Von Kossa FOOTBALL METODE PRINSIPP: Vevssnittene behandles med sølvnitrat -oppløsning, sølv avsettes ved å erstatte fotball og deretter reduseres fra sterkt lys og vises som metallisk sølv. BRUK: unormal kalsium innskudd kan bli funnet i noen område av kroppen. Med H & E flekken, fotball vises blå-lilla dybder. Av von Kossa metode bli svart.
  • 91. viser coronary forkalket aterosklerotisk plakk RESULTATER: kalsiumsalter -black -Red kjerner cytoplasma -Pink
  • 92. PERL'S- REAKSJON PÅ prøyssisk blå IRON PRINSIPP: Fortynnet mineralsyrehydrolyse av treverdig Press jern fra vev forekomster bundet til proteiner, som i sin nærværet av ferrocyanide ioner utfelles som sterkt farget og sterkt vannløselig kompleks, kalium treverdig blå prøyssiske ferrocyanide-. • ferro-ioner ikke produserer en fargereaksjon. • vev forekomster som inneholder treverdig jern er alltid hemosiderin
  • 93. BRUK: • For å demonstrere treverdig jern i vevssnitt. • Små mengder jern finnes normalt milt og benmarg. • Store mengder er hemochromatosis- med innskudd lever og bukspyttkjertel, og med hemosiderosis- innskudd i leveren noder, milt og lymfeknuter. • For å få tilgang benmargen jerninnholdet
  • 94. reagenser: • 2% av kalium ferrocyanid: Kalium ferro - 2,0 g destillert vann - 100,0 ml • Nøytral-rask Red: NR - 1GM destillert vann - 100ml iseddik - 1ml • 2% av saltsyre: . Kons Saltsyre, - 2,0 ml destillert vann - 100,0 ml KONTROLL: Post mortem lunge - høyt antall hjerte cellene som inneholder svikt hemosiderin
  • 95. PROSEDYRE: (Blå Perl Preussen) 1. Deparaffinize og hydrat til destillert vann. 2. Beis med en blanding av like volum av 2% vandig oppløsning kaliumferrocyanid og 2% HCl-løsning i 30 minutter. 3. grundig vasking med destillert vann. 4. Counter flekken med 0,5% nøytral rød litt. 5. Vask i vann fra springen. 6. dehydrere, klare og montere.
  • 96. Hemosiderin i leveren RESULTATER: Iron (hemosiderin) -Blå -Red kjerner Bakgrunn - rosa
  • 97. Farging for mikroorganismer - Ziehl Neelsen (Zn) flekken - Wade Fite Faraco flekken - Gomori Metenamin (heksamin) sølvfarge - Macchia Warthin-Starry - Stain Giemsa - Gram stain
  • 98. Ziehl-Neelsen (Zn) for Mycobacterium Stain bacillus Mykobakterier er vanskelig å påvise med Teknisk Gram fordi de har en kapsel inneholdende en langkjedet fettsyrer som utgjør hydrofobe dem. fenolsyre eller varme kan anvendes for å redusere overflatespenningen og øke porøsiteten.
  • 99. • PRINSIPP Mycobacterias (tuberkel basiller) har en lipid-rik celle vegg som er i stand til å anta fargetoner sterk fenol oppløsninger (f.eks. Carbol løsning), slik at den fargestoff opprettholdes til den neste differensiering syre eller alkohol. Det sies at både syren og alkoholen rask (AAFB = syre og alkohol faste staver). resultater • mykobakterier - Rød • Bakgrunn - lyseblå
  • 100. metode • Sett vannstanden delen. • flom seksjoner Carbol-fuksin og varme til dampende ved å sende en ånd av pad lysbilder flamme på metall rack opp, den eneste trening damp. • Vask glir i destillert vann. Rist av overflødig væske. • Decolourise lysbilder med 20% H2SO4 • Vask i vann fra springen til det ikke mer rød løper overflaten når raset er nedsenket i vann • Vask grundig med vann.
  • 101. • teller flekken metylenblått løsning, 30 sekunder. • Blot og skille fra dehydrering alternative og rehydrering inntil bakgrunnen er en blek delikat Blå. • Undersøk kraftige mikroskop screening og bekrefter hele organismen med en mistanke om olje nedsenking objektiv.
  • 102. Mykobakterier sett på som røde streker
  • 103. holder seg bestandig å sett på bintestinal biops
  • 104. Wade Fite Faraco • Dette punktet brukes til farging basiller i leprocy vevsprøve. • Leprocy basiller er mye mindre syre og alkohol rask av tuberkel basiller. Da alkoholen er fjernet fra fuktighetsgivende og dehydrerende trinn og 10% svovelsyre blir anvendt som et blekemiddel stedet for syre-alkoholoppløsning. • Seksjonen kan også bli funnet ved hjelp av bakke deparaffinised valnøttolje og blandingen av xylen for å beskytte mer delikat voksaktig lag med lepra basiller.
  • 105. PROSEDYRE • Seksjon Varm og deparaffinised bruker blanding av to deler xylen og en del av jordnøttolje i 10 minutter. • tørr og vask av i vannet delen til den er jevnt våt. • Stain Carbol fuschin i 20-30 minutter. • Vask under rennende vann og tørk. • Bleking i svovelsyre ved 10% til det ikke mer rød vises mens nedsenking i vann. • Vask i vann fra springen og teller flekken med 0,2% metylen blå i 5-10 sekunder. • Blot tørr og ikke passer. • flekker bør sees i olje nedsenking linse.
  • 106. Leprrocy og andre røde mycobacteria- blå Background-
  • 107. Warthin-Starry metode for spirochetes (Warthin Starry & 1920) PRINSIPP Organismer er demonstrert av sølv impregneringsteknikk. løsninger acetatbuffer. pH 3.6 natriumacetat 4,1 g Eddiksyre 6,25 ml destillert vann 500 ml 1% av sølvnitrat i pH 3,6 acetatbuffer.
  • 108. • Den kan også anvendes for å demonstrere - Helicobacter pylori i maveslimhinnen - Body Leptospira i nyre biosy - Cat scratch sykdom forbundet basiller på node biops
  • 109. H. pylori på mageslimhinnen av Warthin Starry flekken
  • 110. Leptospira nyrebiopsi kroppen
  • 111. resultatet: Organismer - Svart Bakgrunn - gull gul basiller Cat scratch sykdom lymfeknute biops
  • 112. Gomori Metenamin sølvfarge for sopp • GMS farging er en sølvfarging teknikk for demonstrere sopp i vevssnitt. • Det er primært basert på fargen av polysakkarider i soppcelleveggene, og det kan esseree anvendt for å demonstrere basalmembranen.  PRINSIPP Denne metoden avhenger av reduksjon av sølv fra aldehydgrupper produsert etter oksydasjon av soppveggkomponenter med krom syre.
  • 113. Pneumocystis cariniresultatet: Sopp, Pneumocystis carinii, Melanin - svart Mucin og glycogen- - Grå-sort røde blodceller - gul Bakgrunn - lys grønn
  • 114. GMS flekken for Cryptococcus neoformans
  • 115. basalmembran av GMS flekken
  • 116. Giemsa • PRINSIPP Denne fremgangsmåte er en modifisert versjon av den opprinnelige Giemsa teknikk som brukes for hematologi flekker og gir gode resultater for seksjonene. Giemsa er en Romanowsky flekken inneholder asurblå B og eosin Y og er i stand til å lage subtil skillet nyanser av farge. De sure grupper nukleinsyrer og proteiner av cellekjernen fastslå absorpsjon av blått fargestoff og basen B nærvær av basiske grupper omfatter en affinitet syrer og deres fargen til eosin fargestoffer.
  • 117. • Kan brukes til histopatologisk diagnostikk av malaria og noen andre spirocheten protozo, og blod parasitter. resultater • Micro-organisme, sopp - lilla-blå parasitter • nukleinsyre blå til lilla • Laks Erythrocytes- • cytoplasma - blå • Kollagen, muskler og bein - blek rosa
  • 118. Aspergillus fumigatus på Giemsa
  • 119. Toxoplasma gondi
  • 120. Gram Metode for bakterier • Gram flekken for å skille bakteriene i 2 klasser avhengig av deres struktur og sammensetning av celleveggen • Gram-positive og Gram-negative. • PRINSIPP Crystal Violet farge av nukleinsyrene i bakterier (og stoff bakgrunn) og etter behandling med jod, seksjoner er differensiert i aceton og kontras basert magenta. Stoffet bakgrunn og Gram negativ mister sin blå farge og deretter farget med telleren flekken basert magenta. Gram-positive bakterier som er resistente mot misfarging og vedlikeholde fiolett / blå farge jod krystall.
  • 121. resultatet: Gram-positive mikroorganismer - blå Gram - negative organismer - Rød.
  • 122. gram positive gram negative
  • 123. Kutan anthrax - Gram-positive bakterier blåfarget hud biops
  • 124. referanser • Rosai og Ackerman er kirurgisk pathology- 10th edition • Textbook of microbiology- Ananthanarayan og Paniker av • Internett
  • 125. takk


Legg igjen en kommentar